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B024776 - BIOLOGIA MOLECOLARE APPLICATA
Principali informazioni
Contenuto del corso
Libri di testo consigliati
Obiettivi Formativi
Prerequisiti
Metodi Didattici
Altre Informazioni
Modalità di verifica apprendimento
Programma del corso
Anno Accademico 2017-18
Coorte 2016 - Laurea Triennale (DM 270/04) in BIOTECNOLOGIE
Anno di corso
Secondo Anno - Secondo Semestre
Dipartimento di Afferenza
Medicina Sperimentale e Clinica
Modulo di sola Frequenza di
Settore Scientifico disciplinare
BIO/11 - BIOLOGIA MOLECOLARE
Crediti Formativi
3
Ore Didattica
24
Periodo didattico
01/03/2018 ⇒ 30/04/2019
Frequenza Obbligatoria
No
Tipo Valutazione
Giudizio Finale
Contenuto del corso
mostra
Programma del corso
mostra
Docenza
Contenuto del corso
Clonaggio di sequenze codificanti per proteine, sia in vettori procariotici che eucariotici. Esempi di proteine ricombinanti, soprattutto in campo biomedico. Vettori shuttle. Modulazione dell’espressione genica nella ricerca biomedica: 1) in cellule in coltura (interferenza a RNA ed espressione ectopica di proteine), 2) in animali modello (animali transgenici, tecniche classiche e tecnica CRISPR). Piante transgeniche. Principi di terapia genica. Vaccini ricombinanti. La PCR in diagnostica.
Libri di testo consigliati (Cerca nel catalogo della biblioteca)
Biologia molecolare (Capranico et al.) – EdiSES
Biologia molecolare della cellula (Alberts) - Zanichelli
Biologia molecolare della cellula (Alberts) - Zanichelli
Obiettivi Formativi
Conoscere i principi di base e le applicazioni più attuali della tecnologia del DNA ricombinante, soprattutto in campo biomedico. Avere presente l’impatto che queste nuove tecnologie hanno nel campo della terapia e della diagnostica di varie malattie umane, della profilassi vaccinale e della ricerca di base.
Prerequisiti
I contenuti del corso di “Biologia molecolare”
Metodi Didattici
Lezioni frontali
Altre Informazioni
Corso della prima parte del II semestre del II anno.
Modalità di verifica apprendimento
Esame orale
Programma del corso
L'esperimento di clonaggio. Il vettore pBR322. Vettore pUc e selezione bianco/blu. Vettori di espressione. Vettori inducibili. Clonaggio ed espressione di geni batterici in E.coli. Sintesi del cDNA e costruzione di una library di cDNA. Screening con oligodeossinucleotidi degenerati o con anticorpi specifici. Proteine di fusione con peptide segnale (ormone della crescita, GH) o con Maltose Binding Protein (insulina). Mutagenesi in vitro e sua importanza nella ricerca di base. Mutagenesi di proteine ricombinanti per uso terapeutico. Gli esempi dell'insulina, dell'attivatore del plasminogeno (tPA) e del vaccino ricombinante per la pertosse. Esempio di mutante con azione di dominante negativo: il TNF. Vettori shuttle per lievito e vaccino per l'epatite B. Colture cellulari. Trasfezione e linee stabili. Vettori per cellule di insetto: promotore del baculovirus. Modulazione dell'espressione di specifiche proteine a scopo di ricerca: over-espressione mediante trasfezione di vettori di espressione e modulazione negativa mediante interferenza a RNA (si RNA). Anticorpi monoclonali. Anticorpi ricombinanti di tipo chimerico e umanizzato: esempi di uso in terapia. Animali transgenici e topi knock-out: loro importanza nella ricerca. La tecnica CRISPR. Gli animali clonati. Piante transgeniche: metodi di trasferimento genico ed esempi applicativi. I principi della terapia genica e l’uso di vettori virali per il trasferimento genico. Esempi della sindrome ADA e della fibrosi cistica (CF). Reverse vaccinology: vaccino ricombinante per il meningococco. Vaccini a DNA. Utilizzazione della PCR in diagnostica microbiologica, genetica, oncologica ed in genetica forense.